產(chǎn)品名稱：Beyotime碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號：c0533

產(chǎn)品品牌：碧云天

產(chǎn)品簡介：

碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)是碧云天最新研發(fā)的一種以納米材料為基礎(chǔ)的zui便捷的高效細胞轉(zhuǎn)染試劑，達到甚至超過了國際主流轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效果，并且轉(zhuǎn)染過程無須任何孵育時間，實現(xiàn)了細胞轉(zhuǎn)染的至簡操作。適用于把質(zhì)粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白復(fù)合物或帶負電荷的蛋白轉(zhuǎn)染到真核細胞中，也可以用于活體動物的核酸轉(zhuǎn)染以及用于基因治療。

常見問題：

1. 轉(zhuǎn)染效率低：

a. 優(yōu)化質(zhì)粒與Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑比例，對于難轉(zhuǎn)染的細胞，可適當(dāng)增加Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的用量。

b. 應(yīng)使用高純度、無菌、無污染物的質(zhì)粒進行轉(zhuǎn)染，DNA純度方面A260/A280比值要接近1.8，通常宜控制在1.8-1.9范圍內(nèi)，偏低則有可能有蛋白污染，偏高則有可能有RNA污染。可以使用碧云天生產(chǎn)的質(zhì)粒大量抽提試劑盒(D0026)進行抽提，以保證可以獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。

c. 貼壁細胞轉(zhuǎn)染時狀態(tài)良好，細胞密度達70-80%時才可進行轉(zhuǎn)染，過稀或過密都可能影響轉(zhuǎn)染效率，不同細胞的最佳轉(zhuǎn)染密度需要自行摸索。懸浮細胞宜在對數(shù)生長期進行轉(zhuǎn)染。

d. 需使用無抗生素和無血清培養(yǎng)液配制Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒或siRNA等的混合物。

e. 轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)時間不足，而被誤以為轉(zhuǎn)染效率偏低。不同細胞轉(zhuǎn)染后至顯著表達所需要培養(yǎng)的時間通常為24-48小時。

f. 檢查細胞是否有支原體感染，支原體感染會影響細胞增殖，并很可能影響轉(zhuǎn)染效率。

g. 使用傳代次數(shù)相對較少的細胞，細胞傳代次數(shù)太多，對轉(zhuǎn)染效率會有一定的影響。

h. 如果沒有檢測到目的蛋白表達，應(yīng)該仔細核對轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的測序結(jié)果，確保測序結(jié)果和讀碼框wan全正確。啟動子、復(fù)制起始位點、質(zhì)粒大小都會影響基因表達水平。

i. 如果靶基因的敲減(knockdown)效果欠佳，應(yīng)該考慮嘗試設(shè)計不同的siRNA。

2. 出現(xiàn)一定程度的細胞毒性：

a. 轉(zhuǎn)染前，細胞至少鋪板 18-24 小時。

b. 質(zhì)粒用量不變，Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的用量減少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 質(zhì)粒，4μl Lipo8000™，如果發(fā)現(xiàn)有細胞毒性，六孔板每孔可以嘗試使用 2.5μg 質(zhì)粒，3μl Lipo8000™，此時經(jīng)測試對于轉(zhuǎn)染效率沒有很明顯的影響。

c. 減少質(zhì)粒用量，按照比例減少 Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑；或在前者的基礎(chǔ)上 Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑用量再減少 25%。

d. 檢查是否轉(zhuǎn)染時細胞密度太低，Lipo8000™轉(zhuǎn)染時細胞密度以 70-80%為佳。

e. 某些細胞對 Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑比較敏感，可以在轉(zhuǎn)染后 4-6 小時更換細胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)染效率無顯著影響。

f. 檢查細胞是否有支原體等微生物污染。

產(chǎn)品選購：

北京百奧創(chuàng)新科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)Beyotime碧云天lipo8000轉(zhuǎn)染試劑(c0533)，歡迎選購！